One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Kat.-Nr.: HCR5143A
Das One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) ist ein sondenbasiertes RT-qPCR-Schnelldetektionskit, das für die quantitative Single-Plex- oder Multiplex-PCR unter Verwendung von RNA als Vorlage (z. B. RNA-Virus) geeignet ist.Dieses Produkt verwendet eine neue Generation von Antikörper-modifizierten Taq-DNA-Polymerasen und einstufiger dedizierter Reverse Transkriptase mit einem optimierten Puffer für eine schnelle Amplifikation, der eine schnellere Amplifikationsgeschwindigkeit, höhere Amplifikationseffizienz und Spezifität aufweist.Es unterstützt eine ausgewogene Amplifikation sowohl im Single-Plex als auch im Multiplex von Proben mit niedriger und hoher Konzentration in kurzer Zeit.
Komponenten
1. 5×RT-qPCR-Puffer (U+)
2. Enzymmischung (U+)
Anmerkungen:
A.5×RT-qPCR-Puffer (U+) enthält dNTP und Mg2+;
B.Enzymmischung (U+) umfasst Reverse Transkriptase, Hot Start Taq DNA-Polymerase, RNase-Inhibitor und UDG;
C.Verwenden Sie RNase-freie Spitzen, EP-Röhrchen usw.
Mischen Sie vor der Verwendung den 5×RT-qPCR-Puffer (U+) gründlich.Wenn es nach dem Auftauen zu Niederschlägen kommt, warten Sie, bis der Puffer wieder Raumtemperatur erreicht hat, mischen und lösen Sie ihn auf und verwenden Sie ihn dann normal.
Lagerbedingungen
Das Produkt wird mit Trockeneis geliefert und kann 1 Jahr lang bei -25 bis -15 °C gelagert werden.
Anweisungen
1. Reaktion System
| Komponenten | Volumen (20 μL Reaktion) |
| 2 ×RT-qPCR-Puffer | 4μL |
| Enzymmischung (U+) | 0,8 μL |
| Primer Vorwärts | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Grundierung umgekehrt | 0,1 ~ 1,0 μM |
| TaqMan-Sonde | 0,05 ~ 0,25 μM |
| Vorlage | X μL |
| RNase-freies Wasser | bis zu 25μL |
Hinweise: Das Reaktionsvolumen beträgt 10–50 μl.
2. Fahrradprotokoll (SStandard)
| Zyklus Schritt | Temp. | Zeit | Fahrräder |
| Reverse Transkription | 55 ℃ | 10 Minuten | 1 |
| Erste Denaturierung | 95 ℃ | 30 Sekunden | 1 |
| Denaturierung | 95 ℃ | 10 Sek | 45 |
| Glühen/Verlängern | 60 ℃ | 30 Sekunden |
| Fahrradprotokoll (Schnell) Zyklus Schritt |
Temp. |
Zeit |
Fahrräder |
| Reverse Transkription | 55 ℃ | 5 Minuten | 1 |
| Erste Denaturierung | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturierung | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Glühen/Verlängern | 60 ℃ | 10 s |
Anmerkungen:
A.Die Temperatur der reversen Transkription liegt zwischen 50℃ und 60℃. Eine Erhöhung der Temperatur trägt dazu bei, komplexe Strukturen und Vorlagen mit hohem CG-Gehalt zu verstärken.
B.Die optimale Annealing-Temperatur muss basierend auf dem Tm-Wert des Primers angepasst werden und basierend auf dem Echtzeit-PCR-Instrument muss die kürzeste Zeit für die Fluoreszenzsignalerfassung ausgewählt werden.
Anmerkungen
Bitte tragen Sie die erforderliche PSA, wie Laborkittel und Handschuhe, um Ihre Gesundheit und Sicherheit zu gewährleisten!
