Bst 2.0 DNA-Polymerase (Glycerinfrei, hohe Dichte)
Die Bst-DNA-Polymerase V2 stammt von der DNA-Polymerase I aus Bacillus stearothermophilus ab, die eine 5′→3′-DNA-Polymeraseaktivität und eine starke Kettenaustauschaktivität, aber keine 5′→3′-Exonukleaseaktivität aufweist.Bst DNA Polymerase V2 eignet sich ideal für Strangverdrängung, isotherme Amplifikation LAMP (Loop mediated isothermal amplification) und schnelle Sequenzierung.Diese Bst-DNA-Polymerase V2 ist in der Lage, die DNA-Polymeraseaktivität bei Raumtemperatur zu hemmen, sodass sie betrieben und das Reaktionssystem bei Raumtemperatur formuliert werden kann, wodurch eine unspezifische Amplifikation verhindert und die Effizienz der Reaktion verbessert wird, und diese Version kann lyophilisiert werden.Darüber hinaus ist es in der Lage, seine Aktivität bei erhöhten Temperaturen freizusetzen, sodass kein separater Aktivierungsschritt erforderlich ist.
Komponenten
| Komponente | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst-DNA-Polymerase V2 (glycerinfrei) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Puffer | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Anwendungen
1.LAMP isotherme Verstärkung
2.DNA-Strang-Einzelverdrängungsreaktion
3.High-GC-Gensequenzierung
4.DNA-Sequenzierung im Nanogramm-Bereich.
Lagerbedingungen
Transport unter 0 °C und Lagerung bei -25 °C bis -15 °C.
Einheitendefinition
Eine Einheit ist definiert als die Enzymmenge, die 25 nmol dNTP in 30 Minuten bei 65 °C in säureunlösliches Material einbaut.
LAMP-Reaktion
| Komponenten | 25 μLSystem |
| 10×HC Bst V2 Puffer | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTPs (jeweils 10 mM) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Grün (25×)a | 1,0 μL |
| Grundierungsmischungb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (glycerinfrei) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Vorlage | × μL |
| ddH₂O | Bis zu 25 μL |
Anmerkungen:
1) a.SYTOTM 16 Grün (25×): Je nach experimentellem Bedarf können andere Farbstoffe als Ersatz verwendet werden;
2) b.Primermischung: erhalten durch Mischen von 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB und anderen Volumina.
Reaktion und Zustand
1 × HC Bst V2 Puffer, die Inkubationstemperatur liegt zwischen 60°C und 65°C.
Hitzeinaktivierung
80°C, 20 Min.
