Probenfreisetzungsreagenz
Das Probenfreisetzungsreagenz ist für molekulare POCT-Diagnose-Szenarien vorgesehen.Für die beiden Systeme Direktamplifikation LAMP und Direktamplifikation PCR ist keine Nukleinsäureextraktion erforderlich.Das Rohlysat der Probe kann direkt amplifiziert werden, das Zielgen kann genau nachgewiesen werden, die Probennachweiszeit kann weiter verkürzt werden, was perfekt zu den Anwendungsanforderungen der molekularen POCT passt.Es eignet sich für Nasenabstriche, Rachenabstriche und andere Probenarten.Die verarbeiteten Proben können direkt für die quantitative Echtzeit-Fluoreszenz-PCR oder den LAMP-Nachweis verwendet werden, und ohne komplizierte Nukleinsäureextraktionsvorgänge können die gleichen Ergebnisse wie mit herkömmlichen Extraktionsmethoden erzielt werden.
Lagerbedingungen
Bei Raumtemperatur transportieren und lagern.
Qualitätskontrolle
Funktioneller Nachweis – quantitative qPCR: Das 800μl Sample Release Reagent System wurde amplifiziert
mit 1000 Kopien des neuartigen Pseudovirus, einer Nasenabstrichprobe, was zu ähnlichen Amplifikationskurven führtΔCt-Werte innerhalb von ± 0,5 Ct.
Experimentelles Verfahrenres
1. Nehmen Sie 800 μl Probenfreisetzungsreagenz und verteilen Sie die Lyselösung in einem 1,5-ml-Probenröhrchen
2. Nehmen Sie den Nasen- oder Rachenabstrich mit dem Tupfer. Verfahren zur Probenahme des Nasentupfers: Nehmen Sie den sterilen Tupfer und stecken Sie ihn in die Nasenlöcher, schieben Sie ihn langsam bis zu einer Tiefe von etwa 1,5 cm vor und drehen Sie ihn mehr als 15 Sekunden lang vorsichtig viermal gegen die Nasenschleimhaut Wiederholen Sie dann den gleichen Vorgang an der anderen Nasenhöhle mit demselben Tupfer. Verfahren zur Entnahme von Rachenabstrichen: Nehmen Sie den sterilen Tupfer und wischen Sie die Rachenmandeln und die hintere Rachenwand dreimal vorsichtig und schnell ab.
3.Legen Sie den Tupfer sofort in das Probenröhrchen.Der Tupferkopf sollte gedreht und mindestens 30 Sekunden lang in der Aufbewahrungslösung gemischt werden, um sicherzustellen, dass die Probe vollständig im Probenröhrchen eluiert wird.
4. Inkubation bei Raumtemperatur (20–25 °C) für 1 Minute, die Herstellung des Lysepuffers ist abgeschlossen.
5. Sowohl das 25-μl-System RT-PCR als auch das RT-LAMP waren mit der Zugabe von 10 μl Matrize für Nachweisexperimente kompatibel.
Anmerkungen
1. Die Mindestmenge an direktem Probenlysat, die einem einzelnen Tupfer entspricht, kann auf 400 μl eingestellt werden, was je nach Testanforderungen angepasst werden kann.
2. Sobald die Probe durch das Probenfreisetzungsreagenz verarbeitet wurde, wird empfohlen, die nächste Testphase so schnell wie möglich durchzuführen. Die Wartezeit beträgt vorzugsweise weniger als 1 Stunde.
3. Der pH-Wert des Probenlysats ist sauer und das Nachweissystem muss über einen bestimmten Puffer verfügen.Es ist für die meisten PCR-, RT-PCR- und LAMP-Fluoreszenzdetektionen mit pH-Puffer geeignet, jedoch nicht für die kolorimetrische LAMP-Detektion ohne Puffer.
