Poly-A-Träger-RNA

Kat.-Nr.: HC4001A

Poly A, Polyadenylat, ist eine Mischung aus 100 bis 10.000 Polyadenylaten, die in vitro durch Polynukleotidphosphorylase polymerisiert wird.In vivo wird Poly(a) durch Enzyme an den 3-Terminus der mRNA angefügt, um die Stabilität der mRNA zu verbessern.Bei der Anwendung der Nukleinsäureextraktion kann die Zugabe von Poly A zum Lysat oder zur Bindungslösung die Ausbeute an DNA und RNA verbessern.Der MechanismusDie Menge an Poly A, die die Ausbeute an Nukleinsäure verbessert, ist wie folgt:

1. Gesättigter Kontakt mit der Oberflächenadsorption von Artikeln.Die meisten Polypropylenartikel weisen statische Elektrizität auf der Oberfläche auf, die Nukleinsäuren adsorbieren kann.Carrier-RNA kann diese absättigenAdsorptionseffekte und reduzieren den Verlust von Zielnukleinsäuren.

2. Spurennukleasen inaktivieren: Es gibt verschiedene Nukleasen in biologischen Proben undUmfeld.Poly A kann Spurennukleasen in den Extraktions- oder Konservierungsschritten inaktivierenVerbessern Sie die Ausbeute und Stabilität der Zielnukleinsäuren.

3. Kopräzipitation: Im Nukleinsäurereinigungsschritt der alkoholvermittelten Fällung oder Bindung kann Poly A mit der Zielnukleinsäure kopräzipitieren oder Polymerpartikel bildendie Erholung verbessern.

Verwendungsmethode

Nehmen Sie eine angemessene Menge lyophilisiertes Pulver und geben Sie DEPC-behandeltes Wasser oder eine Guanidinsalzlösung hinzuLösen Sie es in 0,1-1 ug/ul auf, verpacken Sie es dann und lagern Sie es bei -20 °C.

Anwendungen

1. Virus-DNA/RNA-Extraktion: Die Zugabe von 1–5 µg Träger-RNA zum Lysat kann die Ausbeute an RNA/DNA verbessern, die Zielnukleinsäure stabilisieren und den Abbau der gereinigten Nukleinsäure während der Lagerung verhindern.

2. Bei der Mikro-DNA/RNA-Extraktion mittels Säulenmembranmethode (<1 µg) trägt die Zugabe von Träger-RNA zu 1–5 µg zur Verbesserung der Nukleinsäureausbeute bei.

3. Im alkoholvermittelten Nukleinsäure-Fällungs- und Konzentrationsschritt ist die Zugabe von 1–2 µg Träger-RNA hilfreich, um die Gewinnung von Kurzsegment-RNA zu verbessern.

4. Bei der quantitativen Sonden-PCR-Reaktionslösung ist die Zugabe von 10–100 ng Träger-RNA zur Reaktionslösung hilfreich, um die Empfindlichkeit zu verbessern und den C zu reduzieren_TWert.