Robustart Taq DNA-Polymerase

Robustart Taq DNA Polymerase ist eine Hotstart-DNA-Polymerase.Dieses Produkt kann nicht nur die unspezifische Reaktion besser hemmen, die durch das unspezifische Annealing von Primern oder die Primeraggregation im Prozess der PCR-Systemvorbereitung und -Amplifikation verursacht wird.Daher weist es eine ausgezeichnete Spezifität auf und ist effektiver für die Amplifikation von Templaten mit geringer Konzentration und eignet sich für Multiplex-PCR-Amplifikationsreaktionen.Darüber hinaus ist dieses Produkt sehr gut anwendbar und es können stabile Amplifikationsergebnisse bei verschiedenen Arten von PCR-Reaktionen erzielt werden.

Komponenten

1.5 U/μL Robustart Taq DNA-Polymerase

2.10 × PCR-Puffer II (Mg²+-frei) (optional)

3.25 mM MgCl₂(Optional)

* 10 × PCR-Puffer II (Mg²+-frei) enthält kein dNTP und Mg²+, bitte fügen Sie dNTPs und MgCl hinzu₂bei der Vorbereitung des Reaktionssystems.

Empfohlene Anwendungen

1.Schnelle Verstärkung.

2.Mehrfachverstärkung.

3.Direkte Amplifikation von Blut, Abstrichen und anderen Proben.

4.Erkennung von Atemwegserkrankungen.

Lagerbedingungen

-20 °C für Langzeitlagerung, vor Gebrauch gut mischen, häufiges Einfrieren und Auftauen vermeiden.

*Wenn es nach dem Abkühlen zu Niederschlägen kommt, ist das normal;Es wird empfohlen, es vor dem Mischen und der Verwendung auf Raumtemperatur zu bringen.

Einheitendefinition

Eine aktive Einheit (U) ist definiert als die Menge an Enzym, die 10 nmol Desoxyribonukleotid bei 74 °C für 30 Minuten in säureunlösliches Material einbaut, wobei aktivierte Lachssperma-DNA als Matrize/Primer verwendet wird.

Qualitätskontrolle

1.Elektrophoretische Reinheit der SDS-PAGE größer als 98 %.

2.Amplifikationsempfindlichkeit, Chargenkontrolle, Stabilität.

3.Keine exogene Nukleaseaktivität, keine exogene Endonuklease oder Exonukleasekontamination

Anweisungen

Reaktionsaufbau

Anmerkungen:

1) a.Der Puffer enthält kein dNTP und Mg²+, bitte fügen Sie dNTPs und MgCl hinzu₂bei der Vorbereitung des Reaktionssystems.

2) b.Bei Verwendung für qPCR/qRT-PCR sollten dem Reaktionssystem fluoreszierende Sonden hinzugefügt werden.Normalerweise führt eine Endkonzentration des Primers von 0,2 μM zu guten Ergebnissen;Bei schlechter Reaktionsleistung kann die Primerkonzentration im Bereich von 0,2–1 μM eingestellt werden.Die Sondenkonzentration wird normalerweise im Bereich von 0,1–0,3 μM optimiert.Konzentrationsgradientenexperimente können durchgeführt werden, um die beste Kombination aus Primer und Sonde zu finden.

Thermocycling-Protokoll

Anmerkungen

1.Die Amplifikationsrate der schnellen DNA-Polymerase sollte nicht weniger als 1 kb/10 s betragen.Die Temperaturanstiegs- und -abfallrate, der Temperaturkontrollmodus und die Wärmeleitungseffizienz verschiedener PCR-Instrumente variieren stark. Daher wird empfohlen, die optimalen Reaktionsbedingungen für das jeweilige schnelle PCR-Instrument zu optimieren.

2.Das System ist sehr anpassungsfähig und weist eine höhere Spezifität und Empfindlichkeit auf.

3.Geeignet für den Einsatz als hochempfindliche PCR-Nachweisreagenzien und kann in Multiplex-PCR-Amplifikationsreaktionen verwendet werden.

4.5′→3′-Polymeraseaktivität, 5′→3′-Exonukleaseaktivität;keine 3′→5′-Exonukleaseaktivität;keine Korrekturlesefunktion.

5.Geeignet für qualitative und quantitative Tests von PCR und RT-PCR.

6.Das 3′-Ende des PCR-Produkts ist A, das direkt in einen T-Vektor kloniert werden kann.

7.Die dreistufige Methode wird für Primer mit niedrigen Annealing-Temperaturen oder zur Amplifikation von Fragmenten mit mehr als 200 bp empfohlen.