2×PCR Master Mix (ohne Farbstoff)
PCR Master Mix ist eine Art herkömmlicher vorgemischter PCR-Lösung, die gebrauchsfertig ist und Taq-DNA-Polymerase, dNTP-Mischung MgCl2 und optimierten Puffer enthält.Während der Reaktion können zur Amplifikation nur Primer und Templat hinzugefügt werden, was die Arbeitsschritte des Experiments erheblich vereinfacht.Dieses Produkt enthält hervorragende Stabilisatoren und kann 3 Monate bei 4℃ gelagert werden.Das PCR-Produkt weist einen 3′-dA-Vorsprung auf und kann leicht in einen T-Vektor kloniert werden.
Lagerbedingungen
Das Produkt sollte zwei Jahre lang bei -25℃~ -15℃ gelagert werden.
Spezifikationen
Treue (vs. Taq) | 1× |
Heißer Start | No |
Überhang | 3′-A |
Polymerase | Taq-DNA-Polymerase |
Reaktionsformat | SuperMix oder Master Mix |
Reaktionsgeschwindigkeit | Standard |
Produktart | PCR-Mastermix (2×) |
Anweisungen
1.Reaktionssystem
Komponenten | Größe (μL) |
Template-DNA | Geeignet |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR-Mastermix | 25 |
ddH2O | Bis 50 |
2.Verstärkungsprotokoll
Zyklusschritte | Temperatur (°C) | Zeit | Fahrräder |
Vordenaturierung | 94 ℃ | 5 Minuten | 1 |
Denaturierung | 94 ℃ | 30 Sekunden | 35 |
Glühen | 50-60 ℃ | 30 Sekunden | |
Verlängerung | 72 ℃ | 30–60 Sek./KB | |
Letzte Erweiterung | 72 ℃ | 10 Minuten | 1 |
Anmerkungen:
1) Template-Verwendung: 50–200 ng genomische DNA;0,1–10 ng Plasmid-DNA.
2) Mg2+Konzentration: Dieses Produkt enthält 3 mM MgCl2, das für die meisten PCR-Reaktionen geeignet ist.
3) Glühtemperatur: Bitte beziehen Sie sich auf den theoretischen Tm-Wert der Primer.Die Glühtemperatur kann auf 2–5 °C niedriger als der theoretische Wert des Primers eingestellt werden.
4) Verlängerungszeit: Für die molekulare Identifizierung werden 30 Sek./kb empfohlen.Für das Klonen von Genen 60Sek/KB wird empfohlen.
Anmerkungen
1.Zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit tragen Sie bei der Bedienung bitte Laborkittel und Einweghandschuhe.
2.Nur für Forschungszwecke!