DNase I (Rnase-frei) (2 U/ul)
Kat.-Nr.: HC4007B
DNase I ist eine Endonuklease, die einzel- oder doppelsträngige DNA verdauen kann.Es kann Phosphodiesterbindungen hydrolysieren, um Mono- und Oligodesoxynukleotide zu erzeugen, die eine 5'-Phosphatgruppe und eine 3'-OH-Gruppe enthalten.Der optimale Arbeits-pH-Bereich von DNase I liegt bei 7–8.Die Aktivität von DNase I hängt von Ca ab2+und kann durch zweiwertige Metallionen wie CO aktiviert werden2, Mn2+, Zn2+usw. In Gegenwart von Mg2+, DNase I kann jede Stelle doppelsträngiger DNA zufällig spalten;In Anwesenheit von Mn2+DNase I kann doppelsträngige DNA an derselben Stelle spalten und dabei stumpfe Enden oder klebrige Enden mit 1–2 hervorstehenden Nukleotiden bilden.Es kann für die Verarbeitung verschiedener RNA-Proben verwendet werden.
Komponenten
| Name | 1KU | 5KU |
| Rekombinante DNaseI (RNase-frei) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| DNase I-Reaktionspuffer (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Lagerbedingungen
Dieses Produkt sollte 2 Jahre lang bei -25 bis -15 °C gelagert werden.Bitte vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen.
Anweisungen
Wird nur zu Referenzzwecken auf die Entfernung von DNA aus RNA-Proben angewendet.
1. Bitte verwenden Sie RNase-freie Zentrifugenröhrchen und Pipettenspitzen, um das folgende Reaktionssystem vorzubereiten:
| Komponenten | Volumen (μL) |
| DNase I-Reaktionspuffer (10×) | 1 |
| Rekombinantes DNasel (RNase-frei) | 1 |
| RNA | X |
| RNase-freies ddH2O | Bis zu 10 |
2. Die Reaktionsbedingungen sind wie folgt: 37 °C, nach 15–30 Minuten eine Endkonzentration von 2,5 mM EDTA-Lösung hinzufügen und gut mischen, dann 65 °C für 10 Minuten.Die verarbeitete Vorlage kann für nachfolgende RT-PCR- oder RT-qPCR-Experimente usw. verwendet werden.
Anmerkungen
1. DNase l ist empfindlich gegenüber physikalischer Denaturierung;Drehen Sie das Reagenzglas beim Mischen vorsichtig umGut schütteln, nicht zu stark schütteln.
2. Das Enzym sollte bei Verwendung in einer Eisbox oder auf einem Eisbad gelagert werden und unmittelbar nach der Verwendung bei -20 °C gelagert werden.
3. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt.
4. Bitte tragen Sie zu Ihrer Sicherheit Laborkittel und Einweghandschuhe.
