Ultra Nuclease GMP-Qualität
Kat.-Nr.: HC2016A
UltraNuclease in GMP-Qualität wird in Escherichia coli (E. coli) exprimiert und gereinigt, indem es gentechnisch verändert und unter GMP-Umgebungen hergestellt wird.Es kann die Viskosität von Zellüberstand und Zelllysat in der wissenschaftlichen Forschung verringern, die Effizienz der Proteinreinigung erhöhen und die Proteinfunktionsforschung verbessern.Das Produkt kann auch Wirts-Nukleinsäurereste auf pg-Qualität reduzieren und so die Leistung und Sicherheit biologischer Produkte für Anwendungen wie die Virusreinigung, die Impfstoffherstellung und die pharmazeutische Herstellung von Proteinen/Polysacchariden verbessern.Darüber hinaus kann das Produkt auch zur Verhinderung der Verklumpung menschlicher mononukleärer Zellen des peripheren Blutes (PBMC) in der Zelltherapie und Impfstoffentwicklung eingesetzt werden.
UltraNuclease wird in Form eines sterilisierten Reagenzes bereitgestellt, das in Puffer (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % Glycerin) eluiert wird und das Aussehen einer farblosen, transparenten Flüssigkeit hat.Dieses Produkt wird gemäß GMP-Prozessanforderungen hergestellt und in flüssiger Form bereitgestellt.
Komponenten
UltraNuclease GMP-Qualität (250 U/μL)
Lagerbedingungen
Das Produkt wird mit Trockeneis geliefert und kann zwei Jahre lang bei -25℃~-15°C gelagert werden.
Wenn das Produkt geöffnet und länger als eine Woche bei 4℃ gelagert wurde, empfehlen wir eine Filterungdas Produkt, um eine mikrobielle Kontamination zu verhindern.
Spezifikationen
| Ausdruckshost | Rekombinanter E. coli mit UltraNuclease-Gen |
| Molekulargewicht | 26,5 kDa |
| soelektrischer Punkt | 6,85 |
| Reinheit | ≥99 % (SDS-SEITE) |
| Speicherpuffer | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % Glycerin |
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Einheitendefinition | Die Definition einer Aktivitätseinheit (U) ist die Menge an Enzym, die verwendet wirdÄndern Sie den Absorptionswert von ΔA260 in 30 Minuten in 2,625 ml um 1,0Reaktionssystem bei 37℃ mit einem pH-Wert von 8,0 (entspricht einer vollständigen Verdauung von37 μg Lachssperma-DNA in Oligonukleotide). |
Anweisungen
1. Probe Sammlung
Anhaftende Zellen: Entfernen Sie das Medium, waschen Sie die Zellen mit PBS und entfernen Sie den Überstand.
Suspensionszellen: Zellen durch Zentrifugation sammeln, Zellen mit PBS waschen, bei 6.000 zentrifugieren10 Minuten lang bei 100 U/min laufen lassen und das Pellet auffangen.
Escherichia coli: Bakterien durch Zentrifugieren sammeln, einmal mit PBS waschen, bei 8.000 zentrifugieren5 Minuten lang mit U/min laufen lassen und das Pellet auffangen.
2. Probenbehandlung
Behandeln Sie die gesammelten Zellpellets mit Lysepuffer im Verhältnis von Masse (g) zu Volumen (ml)1:(10-20) oder durch mechanische oder chemische Methoden auf Eis oder bei Raumtemperatur (1 g Zellpellet enthält ca
109 Zellen).
3. Enzymbehandlung
1–5 mM MgCl zum Reaktionssystem hinzufügen und den pH-Wert auf 8–9 einstellen.
Fügen Sie UltraNuclease im Verhältnis von 250 Einheiten hinzu, um 1 g Zellpellets zu verdauen, und inkubieren Sie bei 37 °C für mehr als 30 Minuten.Zur Auswahl nutzen Sie bitte das Formular „Empfohlene Reaktionszeit“.Dauer der Behandlung.
4. Überstand Sammlung
30 Minuten lang bei 12.000 U/min zentrifugieren und den Überstand sammeln.
Hinweis: Wenn die Lösung sauer oder alkalisch ist oder hohe Konzentrationen an Salz, Reinigungsmitteln usw. enthältBei Vergällungsmitteln erhöhen Sie bitte die Enzymdosis bzw. verlängern Sie die Behandlungszeit entsprechend.
Empfohlene ReaktionsbedingungenOns
| Parameter | Optimaler Zustand | Effektiver Conditioner |
| Mg²+Konzentration | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT-Konzentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol-Konzentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Konzentration einwertiger Kationen | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Phosphat-Lon-Konzentration | 0-10 mM | 0-100 mM |
Empfohlen Reaktion Zeit (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| UltraNuclease-Menge (Endkonzentration) | Reaktionszeit |
| 0,25 U/ml | >10 Std |
| 2,5 U/ml | >4h |
| 25 U/ml | 30 Minuten |
Anmerkungen:
Bitte tragen Sie die erforderliche PSA, wie Laborkittel und Handschuhe, um Ihre Gesundheit und Sicherheit zu gewährleisten!
